СССР
Государственный стандарт от 01 января 1979 года № ГОСТ 23050-78

ГОСТ 23050-78 Препараты биологические. Вирусвакцина ВГНКИ сухая культуральная против болезни Ауески. Технические условия (с Изменениями N 1, 2)

Принят
Государственным комитетом стандартов Совета Министров СССР
04 апреля 1978 года
Разработан
Министерством сельского хозяйства СССР
01 января 1979 года
    ГОСТ 23050-78
    Группа Р31
    ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР
    ПРЕПАРАТЫ БИОЛОГИЧЕСКИЕ. ВИРУСВАКЦИНА ВГНКИ СУХАЯ КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ПРОТИВ БОЛЕЗНИ АУЕСКИ
    Технические условия
    Biological preparations. Virusvaccinia VGNKI dry cultural against Aujeszky disease. Specification
    ОКП 93 8462*

    ______________
    * Введено дополнительно, Изм. N 1.


    Срок действия с 01.01.79
    до 01.01.84*

    _______________________________
    * Ограничение срока действия снято
    по протоколу N 3-93 Межгосударственного Совета
    по стандартизации, метрологии и сертификации
    (ИУС N 5/6, 1993 год). - Примечание изготовителя базы данных.


    РАЗРАБОТАН Министерством сельского хозяйства СССР
    Исполнители: Н.В.Лихачев, д-р вет. наук, академик ВАСХНИЛ; А.В.Селиванов, д-р вет. наук, профессор (руководители темы); П.М.Базылев, д-р вет. наук А.М.Силаев, канд. вет. наук; Э.М.Прохорова, канд. биол. наук; Г.А.Голикова, канд. вет. наук
    ВНЕСЕН Министерством сельского хозяйства СССР
    Член Коллегии А.Д.Третьяков
    УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета стандартов Совета Министров СССР от 4 апреля 1978 г. N 938
    ВНЕСЕНЫ: Изменение N 1, утвержденное и введенное в действие с 01.01.87 Постановлением Госстандарта СССР от 02.10.86 N 2984, Изменение N 2, утвержденное и введенное в действие с 01.08.90 Постановлением Госстандарта СССР от 13.03.90 N 411
    Изменения N 1, 2 внесены изготовителем базы данных по тексту ИУС N 12, 1986 год, ИУС N 6, 1990 год
    Настоящий стандарт распространяется на культуральную сухую вирусвакцину ВГНКИ, изготовленную из аттенуированного штамма ГНКИ вируса болезни Ауески, полученного в однослойной культуре клеток куриных эмбрионов и подвергнутого лиофильному высушиванию.
    Культуральная сухая вирусвакцина ВГНКИ предназначается для профилактических целей против болезни Ауески свиней, крупного рогатого скота и овец.
    1.ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ
    1.1.Культуральная сухая вирусвакцина ВГНКИ должна изготовляться в соответствии с требованиями настоящего стандарта по технологическим правилам, утвержденным в установленном порядке.
    1.2.Культуральная сухая вирусвакцина ВГНКИ по своим физическим и иммунобиологическим свойствам должна соответствовать требованиям и нормам, указанным в таблице.
    Наименование показателя Характеристика и норма
    Внешний вид Пористая сухая масса бело-серого цвета, допускается слегка розоватый оттенок, без плесени и посторонней примеси
    Влажность, % 1-3
    Растворимость Легко растворяется в физиологическом растворе, образуя равномерную взвесь бело-серого цвета
    Стерильность Посевы на питательные среды не должны давать роста бактериальной микрофлоры и грибов в течение десятисуточного выдерживания в термостате при температуре 37-38 °С и при температуре 20-22 °С
    Активность вакцины по титру инфекционности в культуре клеток куриных эмбрионов, ТЦД, не менее 10
    Активность вакцины по титру инфекционности для кроликов, ЛД, не менее 10
    Авирулентность Вакцина должна быть авирулентной для овец в возрасте 1-5 лет. Овцы, привитые вакциной, не должны иметь видимых признаков заболевания и отклонений от физиологической нормы в течение 20 сут наблюдения
    Иммуногенность Вакцина должна быть иммуногенной для овец в возрасте 1-5 лет. 50%-ная иммунизирующая доза вакцины не должна превышать 5 ЛКД (50%-ная летальная доза для кроликов)
    Наличие вакуума в ампулах Наличие светло-фиолетового или фиолетово-синего свечения, сопровождающегося характерным потрескиванием при испытании

    (Измененная редакция, Изм. N 1, 2).
    1.3.Срок годности культуральной сухой вакцины ВГНКИ - 18 месяцев со дня изготовления.
    2.ПРАВИЛА ПРИЕМКИ
    2.1.Культуральную сухую вирусвакцину ВГНКИ принимают сериями.
    Под серией понимают определенное количество вакцины, одновременно смешанной в одной емкости, фасованной в ампулы или флаконы и высушенной в отдельном вакуум-аппарате, получившей свой номер, номер государственного контроля и оформленной одним документом о качестве.
    2.2.Каждая серия вирусвакцины должна быть принята (проверена) государственным контролером Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветпрепаратов.
    2.3.Для контроля качества препарата от каждой серии отбирают 50 ампул или флаконов вакцины.
    2.1-2.3.(Измененная редакция, Изм. N 2).
    2.3а. Определение иммуногенности проводят периодически на каждой десятой серии вакцины.
    (Введен дополнительно, Изм. N 1).
    2.4.При получении неудовлетворительных результатов испытаний хотя бы по одному из показателей по нему проводят повторные испытания на удвоенном количестве ампул, отобранных от той же серии культуральной сухой вирусвакцины ВГНКИ, удваивая количество испытаний по каждому показателю.
    2.5.Контроль качества определенной серии препарата по требованию потребителя проводит государственный контролер на предприятии-изготовителе или Всесоюзный государственный научно-контрольный институт ветеринарных препаратов.
    (Измененная редакция, Изм. N 2).
    3.МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ
    3.1.Метод отбора проб
    3.1.1.Ампулы отбирают из разных мест упаковочной единицы. 25 ампул или флаконов вирусвакцины используют для проведения испытаний, а остальные хранят в архиве государственного контролера.
    (Измененная редакция, Изм. N 2).
    3.2.Внешний вид, наличие или отсутствие посторонней примеси, изменение консистенции определяют визуально.
    3.3.Определение остаточной влажности - по ГОСТ 24061-80*.

    ______________
    * На территории Российской Федерации действует ГОСТ 24061-89. - Примечание изготовителя базы данных.


    (Измененная редакция, Изм. N 1).
    3.3.1-3.3.3.(Исключеы, Изм. N 1).
    3.4.Растворимость вирусвакцины определяют, растворяя содержимое ампулы в 10 см физиологического раствора.
    После встряхивания препарат должен полностью раствориться в течение 2-3 мин.
    (Измененная редакция, Изм. N 1).
    3.5.Определение стерильности
    3.5.1.Аппаратура, материалы и реактивы
    Для проведения испытания применяют:
    термостат с температурой нагрева 37-38 °С;
    автоклав;
    флаконы вместимостью 100 см;
    пипетки по ГОСТ 20292-74*;

    ________________
    * На территории Российской Федерации действуют ГОСТ 29169-91, ГОСТ 29227-91-ГОСТ 29229-91, ГОСТ 29251-91-ГОСТ 29253-91, здесь и далее по тексту. - Примечание изготовителя базы данных.


    пробирки стеклянные по ГОСТ 25336-82;
    воронки стеклянные;
    пробки ватномарлевые;
    пептон сухой ферментативный по ГОСТ 13805-76;
    агар микробиологический по ГОСТ 17206-84*;

    ______________
    * На территории Российской Федерации действует ГОСТ 17206-96. - Примечание изготовителя базы данных.


    бульон мясопептонный по ГОСТ 20730-75;
    раствор Хенкса (рабочий);
    0,5%-ный раствор гидролизата лактальбумина - среду ГЛА;
    вазелин медицинский по ГОСТ 3582-84;
    глюкозу по ГОСТ 975-75*.

    ______________
    * На территории Российской Федерации действует ГОСТ 975-88. - Примечание изготовителя базы данных.


    (Измененная редакция, Изм. N 1).
    3.5.2.Подготовка к испытанию
    Готовят в соответствии с действующей рецептурой мясопептонный агар (МПА) с 1% глюкозы, мясопептонный бульон (МПБ) с 1% глюкозы, мясопептонный печеночный бульон (МППБ) под вазелиновым маслом (среда Китт-Тароцци), среду Сабуро. Среды разливают по 8-10 см в пробирки и по 50 см во флаконы, закрывают ватномарлевыми пробками и пергаментными колпачками и стерилизуют в автоклаве в течение 30 мин при 0,15 МПа.
    (Измененная редакция, Изм. N 1).
    3.5.3.Проведение испытания
    Пять ампул или флаконов сухой вирусвакцины отдельно растворяют в растворе Хенкса или в среде ГЛА. Для этого в каждую ампулу или флакон, содержащие до лиофилизации 2 см вакцины, добавляют 10 см раствора, а в ампулу или флакон, содержащий до лиофилизации 4 см вакцины, добавляют 20 см раствора рН 7,2. Затем производят посев из каждой ампулы или флакона вирусвакцины в количестве 0,3-0,5 см в пробирки с МПА с 1% глюкозы, со средой Сабуро, с МПБ с 1% глюкозы и МППБ под вазелиновым маслом и во флаконы в количестве 2-5 см с МПБ и МППБ. Посевы производят в две пробирки и в один флакон с каждой средой из одной ампулы или флакона вирусвакцины. Питательные среды с посевами выдерживают в течение 10 сут в термостате при 37-38 °С (для агара Сабуро - 20-22 °С). В питательных средах с посевами не должно быть роста бактериальной микрофлоры и грибов.
    (Измененная редакция, Изм. N 1, 2).
    3.6.Определение активности вакцины по титру инфекционности в культуре клеток куриных эмбрионов
    3.6.1.Оборудование и реактивы
    Для проведения испытания применяют:
    колбы мерные вместимостью 10 и 100 см по ГОСТ 1770-74 или флаконы вместимостью 10 и 100 см;
    пипетки по ГОСТ 20292-74;
    раствор Хенкса (рабочий).
    (Измененная редакция, Изм. N 1).
    3.6.2.Подготовка к испытанию
    Берут пять ампул или флаконов вакцины. Готовят десятикратные разведения вирусвакцины в растворе Хенкса, как указано в п.3.5.3. После тщательного перемешивания, получив разведение вакцины 10, 1 см этого разведения вносят во второй флакон (колбу) с 9 см раствора Хенкса, тщательно перемешивают, затем из второго флакона (колбы) берут 1 см раствора и вносят в третий, содержащий 9 см раствора Хенкса, и так далее, до восьмого флакона (колбы), получая последовательно разведения: 10, 10, 10, 10, 10, 10, 10, 10.
    (Измененная редакция, Изм. N 1, 2).
    3.6.3.Проведение испытания
    Вакциной каждого разведения заражают не менее четырех пробирочных культур клеток куриных эмбрионов. Окончательный учет результатов титрования вакцины проводят через 120 ч после заражения. Титр инфекционности вакцины (ТЦД) определяют по методу Рида
    и Менча.
    3.7.Определение активности вакцины по титру инфекционности для кроликов
    3.7.1.Готовят последовательно разведения вирусвакцины 10, 10, 10, 10, 10, 10, как указано в п.3.6.2. Для разведения вакцины можно использовать раствор Хенкса или стерильный физиологический раствор с рН 7,0-7,2.
    Пользуясь одним шприцом, вакцину вводят кроликам массой (2,0±0,1) кг внутримышечно в область наружной стороны бедра от большего разведения к меньшему:
    четырем кроликам - по 1 см в разведении 10;
    четырем кроликам - по 1 см в разведении 10;
    четырем кроликам - по 1 см в разведении 10;
    четырем кроликам - по 1 см в разведении 10.
    Наблюдение за привитыми кроликами ведут в течение 10 сут.
    Титр инфекционности вирусвакцины для кроликов определяют по методу Рида и Менча.
    (Измененная редакция, Изм. N 1).
    3.8.Испытание на авирулентность и иммуногенность
    3.8.1.Авирулентность каждой серии вакцины проверяют на двух овцах не ниже средней упитанности в возрасте 1-5 лет.
    Вакцину разводят стерильным физиологическим раствором в зависимости от ее активности по титру инфекционности для кроликов.
    Вакцину с титром инфекционности для кроликов 10 ЛКД разводят 1:25, 10 ЛКД - 1:50, 10 ЛКД - 1:250.
    Для получения разведения 1:25 вакцину из ампулы, объем которой до лиофилизации составлял 2 см, растворяют в 25 см физиологического раствора, объем которой составлял 4 см - в 50 см.
    Для получения разведения 1:50 вакцину из ампулы, объем которой до лиофилизации был равен 2 или 4 см, растворяют соответственно в 50 или 100 см физиологического раствора.
    Для получения разведения 1:250 вакцину из ампулы, объем которой до лиофилизации был равен 2 или 4 см, растворяют соответственно в 250 или 500 см физиологического раствора.
    Для определения авирулентности разведение вакцины, приготовленное в соответствии с ее активностью по титру инфекционности для кроликов, вводят овцам подкожно в области внутренней стороны бедра в дозе 2 см.
    За иммунизированными животными ведут наблюдение в течение 20 сут с ежедневным измерением температуры тела утром и вечером. Вакцинированные животные за период наблюдения не должны иметь клинических признаков заболевания и отклонений от физиологической нормы. Допускается у привитых животных повышение температуры тела на 1 °С в течение 3-5 сут после введения вакцины.
    На иммуногенность проверяют каждую десятую серию вакцины на 18 овцах не ниже средней упитанности в возрасте 1-5 лет.
    В зависимости от активности вакцины по титру инфекционности для кроликов готовят 4 десятикратных разведения, содержащих 0, 1, 10 и 100 ЛКД вируса. Если активность вакцины по титру инфекционности для кроликов равна 10 ЛКД, то в разведении вакцины 10 содержится 1 ЛКД вируса, в разведении 10 - 10 ЛКД, а в разведении 10 - 0.
    Одним шприцем, начиная от большего разведения к меньшему, вводят 16 овцам подкожно с внутренней стороны бедра по 1 см соответствующего разведения вакцины. Каждое разведение вакцины проверяют на 4 овцах.
    Через 20-25 сут иммунизированным и двум контрольным (интактным) овцам вводят подкожно 200 ЛКД вирулентного вируса в объеме 1 см.
    Наблюдение за животными ведут в течение 15 сут с измерением температуры тела два раза в день (утром и вечером).
    Результаты титрования учитывают по гибели овец в течение 15 сут наблюдения.
    50%-ная иммунизирующая доза вакцины (ИмД) не должна превышать 5 ЛКД.
    Иммуногенную активность вакцины () в ИмД вычисляют по формуле
    ,
    где - логарифм наименьшего разведения, обеспечивающего 100%-ный (или максимальный) защитный (положительный) эффект, взятый с противоположным знаком;
    - логарифм кратности разведения, равный единице;
    - сумма долей положительного эффекта, начиная с ;
    0,5 - постоянный коэффициент.
    Пример 1. При определении иммуногенности вакцины в опыте на овцах получены результаты, приведенные в табл.2.
    Таблица 2
    Разведение вакцины Обратный логарифм разведения Число животных на разведение Число животных с положительным эффектом Доля животных с положительным эффектором
    10 3 4 4 1,0
    10 4 4 3 0,75
    10 5 4 0 0,00
    =1,75

    ИмД, (50%-ная иммунизирующая доза для овец).
    Это значит, что в 1 см вакцины, разведенной до исходного (перед лиофилизацией) объема, содержится 17780 ИмД.
    Пример 2. При определении иммуногенности вакцины получены результаты, приведенные в табл.3.
    Таблица 3
    Разведение вакцины Обратный логарифм разведения Число животных на разведение Число животных с положительным эффектом Доля животных с положительным эффектором
    10 4 4 3 0,75
    10 5 4 2 0,50
    10 6 4 0 0,00
    =1,25

    ИмД.
    Это значит, что в 1 см вакцины, разведенной до исходного (перед лиофилизацией) объема, содержится 56230 ИмД.
    Для определения соотношения в вакцине ИмД и ЛКД необходимо количество ЛКД, содержащееся в 1 см данной серии вакцины, разделить на количество ИмД.
    Пример 3. ИмД=17780 ИмД.
    Инфекционная активность () для кроликов равна 10 ЛКД=10000 ЛКД.
    .
    Пример 4. ИмД=56230 ИмД;
    =10 ЛКД=100000 ЛКД.
    .
    50%-ная иммунизирующая доза вакцины не должна превышать 5 ЛКД.
    (Измененная редакция, Изм. N 1).
    3.9.Определение вакуума
    Наличие вакуума в ампулах проверяют аппаратом Д'Арсонваля или другим аппаратом.
    (Введен дополнительно, Изм. N 2).
    4.УПАКОВКА, МАРКИРОВКА, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ
    4.1.Вируссодержащую жидкость смешивают в соотношении 1:1 со средой высушивания и фасуют в стерильные ампулы по ОСТ 64-2-485-85 по 2 и 4 см или флаконы по ТУ 64-2-10-87. Ампулы и флаконы замораживают при температуре минус 40 °С и подвергают лиофильному высушиванию, после чего ампулы запаивают под вакуумом при остаточном давлении 26,7 Па, а флаконы закрывают резиновыми пробками по ТУ 38.006.105-84 и закатывают алюминиевыми колпачками по ОСТ 64-009-86.
    (Измененная редакция, Изм. N 2).
    4.2.На ампулы, флаконы наклеивают этикетки или несмываемой краской по стеклу наносят обозначения:
    товарный знак предприятия-изготовителя;
    краткое наименование препарата (вакцина ВГНКИ против болезни Ауески);
    номер серии;
    объем вакцины, см;
    срок годности.
    (Измененная редакция, Изм. N 1, 2).
    4.3.Ампулы или флаконы с вакциной упаковывают в картонные коробки по 10 шт. или полистироловые коробки по 9 шт. с наличием перегородок (прокладок), обеспечивающих неподвижность и целостность ампул или флаконов в коробке.
    На коробку наклеивают этикетку, на которой указывают:
    наименование предприятия-изготовителя и его товарный знак;
    наименование вакцины;
    номер серии;
    номер госконтроля;
    дату изготовления;
    срок годности;
    количество ампул или флаконов в коробке;
    количество вакцины в ампулах и флаконах;
    условия хранения биопрепарата;
    разведение содержимого одной ампулы или одного флакона в физиологическом растворе;
    количество доз в одной ампуле;
    обозначение настоящего стандарта.
    В каждую коробку вкладывают наставление по применению.
    (Измененная редакция, Изм. N 2).
    4.4.Коробки с вакциной упаковывают в дощатые ящики по ГОСТ 13357-81 массой брутто не более 20 кг.
    Внутрь каждого ящика вкладывают контрольный лист с указанием:
    наименования вакцины;
    количество ампул или флаконов вакцины и коробок в ящике;
    даты упаковки;
    номера серии;
    номера или фамилии упаковщика.
    (Измененная редакция, Изм. N 1, 2).
    4.5.На каждое грузовое место наносят транспортную маркировку по ГОСТ 14192-77* с указанием манипуляционных знаков: "Осторожно, хрупкое", "Боится нагрева" и предупредительную надпись "Биопрепараты".

    _______________
    * На территории Российской Федерации действует ГОСТ 14192-96. - Примечание изготовителя базы данных.


    Маркировка, характеризующая данные об упакованной продукции, должна содержать следующие дополнительные обозначения:
    наименование предприятия-изготовителя;
    наименование препарата;
    количество препарата в ящике;
    срок годности;
    условия хранения;
    обозначение настоящего стандарта.
    4.6.Транспортируют культуральную сухую вирусвакцину ВГНКИ против болезни Ауески транспортом всех видов в соответствии с правилами перевозок скоропортящихся грузов и багажа, действующими на транспорте данного вида.
    4.5, 4.6. (Измененная редакция, Изм. N 1).
    4.7.Культуральную сухую вирусвакцину ВГНКИ против болезни Ауески хранят в сухом темном помещении при температуре не выше 10 °С.
    (Измененная редакция, Изм. N 2).
    5.УКАЗАНИЕ ПО ПРИМЕНЕНИЮ
    5.1.Культуральную сухую вирусвакцину ВГНКИ против болезни Ауески применяют в ветеринарной практике в соответствии с наставлением по ее применению, утвержденным в установленном порядке.
    (Измененная редакция, Изм. N 2).